鐵皮石斛是蘭科石斛屬多年生附生草本植物,又名黑節草,具有益胃生津、滋陰清熱、清咽利嗓,提高人體免疫能力、抗腫瘤、抗衰老等功效。多附生在亞熱帶人跡罕至的深山密林陰濕懸崖峭壁處、樹上或長青苔的岩石上。
鐵皮石斛的莖段快速繁殖直接取材於幼嫩莖段,具有取材易、速度快、污染率低、繁殖係數高等優點,可在短期內為生產提供大量栽培用苗。
一、外植體的消毒
石斛莖段在無菌操作台上用75%的酒精進行表面消毒,去掉灰塵,再用0.1%的昇汞滅菌5~8分鐘,用無菌水沖洗3次,在此過程中應不斷搖晃燒杯,使其充分滅菌。
二、試驗過程
將已經滅菌的石斛莖段,在無菌條件下切成至少帶有一個莖節的莖段,接種於誘導培養基中誘導出芽,將芽再誘導出原球莖,原球莖再分化,再壯苗,便可將生長健壯的植株移栽。
三、培養基
基本培養基為N6,附加0.75%瓊脂,3%白糖,PH值為5.8,培養基進行常規高溫高壓滅菌,溫度為121℃,1.1Mpa,15分鐘即可。激素添加如下1誘導莖節發芽:N6+BA2.5毫克/升;2誘導芽形成原球莖:N6+BA2.5毫克/升+I-BA 0.5毫克/升;3誘導原球莖分化為植株:N6 BA 1.5毫克/升 NAA 1.2毫克/升+香蕉汁5%;4生根壯苗培養:N6 NAA 2.5毫克/升 土豆汁10%。
或基本培養基為MS,附加0.75%瓊脂,3%白糖,pH5.8。
1、芽增殖培養基:MS+NAA 0.1~0.5毫克/升+BA0.5~2.0毫克/升;
2、壯苗培養基:MS無激素培養基;
3、生根培養基:1/2MS IBA0.1毫克/升。
四、培養條件
溫度控制在25±1℃,日光燈照射,每天12小時。
五、移栽
移栽時先將已經長大的石斛種苗取出,用清水洗去根部的培養基,洗淨為止,動作要輕,避免損傷其根和葉。然後栽種在以礦質岩:泥炭土為1︰1的基質中。放在遮蔭棚裡練苗一周,便可正常管理,保持濕度80%,溫度不可超過35℃,不接受長時間的陽光直射。