藥材及成方制劑顯微鑒別法"藥材及成方制劑顯微鑒別法
顯微鑒別系指用顯微鏡對藥材的切片、粉末、解離組織或表面製片及成方制劑中藥味的組織、細胞或內含物等特徵進行鑒別的一種方法。鑒別時選擇有代表性的樣品，根據各該藥材鑒別項的規定製片。成方制劑根據不同劑型適當處理後製片。
一、橫切片或縱切片：選取藥材適當部位，軟化後用徒手或滑走切片法，切成10～20μm的薄片,選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理後觀察。必要時可包埋後切片。
二、粉末製片：取粉末少量，置載玻片上，攤平，選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它適當試液處理後觀察。
三、表面製片：將樣品濕潤軟化後,切取一部分或撕取其表皮,加適宜的試液觀察。
四、解離組織片：如樣品中薄壁組織佔大部分，木化組織少或分散存在，可用氫氧化鉀法；如果品堅硬，木化組織較多或集成較大群束，可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在解離前，應先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片。
1．氫氧化鉀法
置樣品於試管中，加5％氫氧化鉀溶液適量，加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去鹼液，加水洗滌後，取出少量置載玻片上，用解剖針撕開，以稀甘油裝置觀察。
2．硝鉻酸法
置樣品於試管中,加硝鉻酸試液適量，放置，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，加水洗滌後，照1．法操作裝置。
3．氯酸鉀法
置樣品於試管中，加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱，待產生的氣泡漸少時，再及時加入氯酸鉀少量，以維持氣泡穩定地發生，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，加水洗滌後，照1．法操作裝置。
五、花粉粒與孢子製片：取花粉、花藥（或小的花朵）或孢子囊群（乾燥樣品浸於冰醋酸中軟化），用玻璃棒搗碎，過濾於離心管中，離心，取沉澱加新鮮配製的醋酐與硫酸(9︰1)的混合液1～3ml，置水浴上加熱2～3分鐘，離心，取沉澱，用水洗滌2次,加50％甘油與1％苯酚3～4滴,用品紅甘油膠封藏觀察。也可用水合氯醛試液裝置觀察。
六、細胞及細胞內含物等的測量：在顯微鏡下測量細胞及細胞內含物等的大小，可用目鏡測微尺測量。先將目鏡測微尺裝入目鏡內，用鏡台測微尺標化。標化時，轉動目鏡，移動鏡台測微尺，使兩種量尺的刻度平行，左邊的「0」 刻度重合，再找第二條重合刻度。根據兩條重合刻度間兩種量尺的小格數，計算出目鏡測微尺每小格在該物鏡條件下所相當的大小（μm）。測量時,以目鏡測微尺測量目的物的小格數，乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物鏡下進行，但欲測量較長的如纖維、非腺毛等的長度時,則以在低倍物鏡下測量較為方便。記錄最大值與最小值（μm）,可允許有少量略高或略低於藥典規定的數值。
七、細胞壁性質的檢定：
1．木質化細胞壁
加間苯三酚試液1～2滴，稍放置，加鹽酸1滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。
2．木栓化或角質化細胞壁
加蘇丹Ⅲ試液，稍放置或微熱，顯橘紅色至紅色。
3．纖維素細胞壁
加氯化鋅碘試液；或先加碘試液濕潤後，稍放置,再加硫酸溶液(33→50)；顯藍色或紫色。
4．硅質化細胞壁
加硫酸無變化。
八、細胞內含物性質的檢定：
1．澱粉粒
（1）加碘試液，顯藍色或紫色。
（2）用甘油醋酸試液裝置，置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的澱粉粒顯偏光現象；已糊化的無偏光現象。
2．糊粉粒
（1）加碘試液，顯棕色或黃棕色。
（2）加硝酸汞試液,顯磚紅色。材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚或石油醚脫脂後進行試驗。
3．脂肪油、揮發油或樹脂（1）加蘇丹Ⅲ試液，顯橘紅色、紅色或紫紅色。
（2）加90％乙醇，脂肪油不溶解（篦麻油及巴豆油例外），揮發油則溶解。
4．菊糖
加10％α－萘酚乙醇溶液，再加硫酸，顯紫紅色並很快溶解。
5．粘液
加釕紅試液，顯紅色。
6．草酸鈣結晶（1）加稀醋酸不溶解，加稀鹽酸溶解而無氣泡發生。
（2）加硫酸溶液（1→2），逐漸溶解，片刻後析出針狀硫酸鈣結晶。
7．碳酸鈣（鐘乳體）
加稀鹽酸溶解，同時有氣泡發生。
8．硅質
加硫酸不溶解。
九、鑒別由粉末藥材製成的成方制劑時，散劑照上述粉末製片法製片；丸劑、片劑等，可取2～3丸（片）研細後，取少量樣品，滴加規定的試液，攪拌均勻，使粘結的細胞、組織散離，再按粉末特徵進行鑒別；蜜丸可直接挑取少量樣品製片，或酌用熱水脫蜜後製片觀察。
附：顯微試液配製法
三氯化鐵試液
取三氯化鐵1g，加水使溶解成100ml，即得。
水合氯醛試液
（見附錄ⅩⅤ Ｂ）。
甘油醋酸試液
取甘油、醋酸及水各等份，混勻，即得。
蘇丹Ⅲ試液
（見附錄ⅩⅤ Ｂ）。
釕紅試液
取10％醋酸鈉溶液1～2ml，加釕紅適量使呈酒紅色，即得。
本液應臨用新制。
間苯三酚試液
取間苯三酚1g，加90％乙醇100ml使溶解，濾過，即得。
本液應置棕色玻璃瓶內，在暗處保存。
組織解離液
（1）取硝酸10ml，加入100ml水中，混勻。 （2） 取鉻酸10g，加水100ml使溶解。用時將二液等量混合，即得。
品紅甘油膠
取動物膠1g，加水6ml，浸泡至溶化，再加甘油7ml，加熱並輕輕攪拌至完全混勻，用紗布濾於培養皿內，加鹼性品紅溶液(鹼性品紅0.1g，加無水乙醇600ml及樟油80ml，溶解)適量，混勻，凝固後即得。
α－萘酚試液
取15％的α－萘酚乙醇溶液10.5ml,緩緩加硫酸6.5ml，混勻後再加乙醇40.5ml及水4ml，混勻，即得。
銅氨試液
取碳酸銅0.5g，加水適量，置乳體中研磨，再加濃氨溶液10ml使溶解，即得。
硝酸汞試液
取汞4.5g ，加發煙硝酸3ml，俟作用完畢，加等量水稀釋，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內，在暗處保存。
氯化鋅碘試液
取碘化鉀8g，加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.5g使溶解，加碘適量至飽和，即得。
本液應置棕色玻璃塞瓶內保存。"
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